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      Template Eliminator是在Dpnl與SgeI基礎上開發(fā)得到的具有更好的質(zhì)粒消化效果的一款酶。該酶通過按一定比例將Dpnl與Sgel混合得到。由于DpnI切割Dam?的底物，SgeI切割Dcm?的底物，二者混合以后可以相互彌補，從而提高對質(zhì)粒的消化效率。

      DpnI 需要在識別序列中存在 N6-甲基腺嘌呤，才能切割 DNA。從 Dam? 菌株純化的 DNA 將是 DpnI 的底物。DpnI 只能切割完全腺甲基化 Dam 位點。半腺甲基化 Dam 位點的 DpnI 切割速度慢60倍。SgeI 可切割在單鏈或雙鏈 DNA 上含有5-甲基胞嘧啶的 DNA 靶標。通過 Dcm 或 CpG 甲基轉(zhuǎn)移酶甲基化的 DNA 將成為 SgeI 的底物。為實現(xiàn)有效切割，至少需要復制兩個 SgeI 識別序列。甲基化 DNA 完全酶切所需的酶量取決于 SgeI 識別位點的數(shù)量。因此，將DpnI與SgeI通過一定比例混合，可以覆蓋更多的使用場景，兼顧更多的宿主類型，提高點突變的靈活性。

      經(jīng)驗證，本產(chǎn)品對于不同類型的模板，質(zhì)粒殘留率僅為DpnI的10~20%，僅為SgeI的0.1~1%。同時該酶可以適應常規(guī)PCR反應Buffer，從而可以在擴增完成后直接進行消化。

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