400-830-9659
瓊脂糖是線性多糖,是由半乳糖和內(nèi)醚半乳糖這兩種單糖交替連接構(gòu)成的。瓊脂糖為白色或微黃色的粉末,無臭。熱水是其最好的溶劑,亦能溶于二甲基亞砜及甲酰胺溶液中。瓊脂糖在水中一般加熱到90℃以上溶解,溫度下降到35-40℃時形成良好的半固體狀的凝膠,這是它具有多種用途的主要特征和基礎(chǔ)。瓊脂糖溶液冷卻時,兩條瓊脂糖分子的糖鏈會以雙螺旋的方式纏繞,生成三維的網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)。經(jīng)過進(jìn)一步的冷卻,離散的雙螺旋體會聚集起來且緊密排列,形成更加堅硬的凝膠。常用于配制核酸分析凝膠,例如用于DNA或RNA電泳的瓊脂糖凝膠等。
儲存與運(yùn)輸
室溫運(yùn)輸;室溫干燥保存5年。
凝膠配制操作步驟
1. 配制適量的制膠及電泳緩沖液(常用0.5 x TBE或1 x TAE緩沖液)(推薦ABC3019、ABC3020);
2. 根據(jù)制膠量及凝膠濃度,將準(zhǔn)確稱量的瓊脂糖粉末加入含有一定量的電泳緩沖液玻璃三角錐形瓶中(加入電泳緩沖液體積不宜超過錐形瓶50%的容量);
3. 使用保鮮膜或PE手套套在錐形瓶口上,然后在微波爐中加熱溶解瓊脂糖(注意:當(dāng)加熱時溶液沸騰后,請帶上隔溫手套,小心晃動錐形瓶,使瓊脂糖充分均勻溶解,重復(fù)此操作數(shù)次,直至瓊脂糖顆粒完全溶解;在微波爐中加熱時間不宜過長,每次當(dāng)溶液開始沸騰起泡時停止加熱,否則容易引起溶液過熱暴沸外溢出來,造成凝膠濃度不精確;同時瓊脂糖溶解時,必須保證其完全徹底溶解,否則會造成電泳圖像模糊或者有亮點(diǎn)顆粒呈現(xiàn));
4. 待溶液冷卻至50℃左右時,可加入一定比例的核酸染料(SerRed核酸染料或其他核酸染料等)(推薦ABC3624)后并充分混勻;
5. 將瓊脂糖溶液倒入制膠槽中,選擇合適梳子并插入對應(yīng)位置,凝膠厚度一般控制在3 ~ 5mm之間,如后續(xù)實(shí)驗需要選擇切膠回收膠條中的核酸,可適當(dāng)增加凝膠厚度,如凝膠中有氣泡需將其趕出。
6. 在室溫下30 min左右凝膠即可凝固(不同濃度凝膠凝固時間不同,根據(jù)實(shí)際情況調(diào)整),拔出梳子后凝膠置于電泳槽中電泳使用,電泳緩沖液宜沒過凝膠中的加樣孔。
推薦瓊脂糖凝膠濃度與線型DNA分離范圍
瓊脂糖凝膠濃度 | 線型DNA分離范圍(bp) |
0.5% | 1000 ~ 30000 |
0.7% | 800 ~ 12000 |
1.0% | 500 ~ 10000 |
1.2% | 400 ~ 7000 |
1.5% | 200 ~ 3000 |
2.0% | 50 ~ 2000 |
注意事項
1. 用于配制凝膠的緩沖液與用于電泳的緩沖液需完全一致。
2. 加入核酸染料后,需充分混勻,否則易造成電泳條帶扭曲。
3. 如需配制高濃度(>=2.5%)的瓊脂糖凝膠,可在步驟3完成后,室溫靜置10min,再進(jìn)行加熱瓊脂糖溶液,該操作有利于瓊脂糖溶解更均勻。
4. 瓊脂糖凝膠推薦現(xiàn)配現(xiàn)用,或室溫放置不超過4小時。如需長時間存放,可將凝膠使用保鮮膜包裹后置于4℃并避光,一般可保存2-5天,電泳條帶亮度或清晰度可能略微下降。
5. 如使用凝膠回收試劑盒回收切割凝膠膠條中的DNA,根據(jù)試劑盒產(chǎn)品說明書,推薦膠條融化溫度60±5℃。
本產(chǎn)品僅供科研用途,不用于臨床診斷!
(產(chǎn)品包裝升級中,以實(shí)物為準(zhǔn)。)
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