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      TTC（2，3，5-氯化三苯基四氮唑），是一種脂溶性光敏感復合物，可用于檢測種子的生存能力，或檢測哺乳動物組織的缺血梗塞。其基本原理在于，TTC是呼吸鏈中吡啶——核苷結構酶系統(tǒng)的質(zhì)子受體，能與正常組織中的脫氫酶反應生成不溶于水的紅色三苯基甲臜（TTF）化合物。正常組織和有活力的種子中富含脫氫酶，可與TTC反應呈現(xiàn)紅色，如果組織缺血梗塞死亡或種子生活力衰退，則不能與TTC反應，組織不能著色或染色很淺。據(jù)此可根據(jù)染色部位和深淺判定組織缺血梗塞程度或種子活力。

      本產(chǎn)品TTC染液中TTC濃度為0.5%，適用于動物組織缺血梗塞的染色。組織正常區(qū)呈紅色，缺血梗死區(qū)呈白色。

儲存與運輸

      冰袋（wet ice）運輸；2-8℃避光保存，有效期3個月。

使用方法

樣本前處理：經(jīng)腦梗實驗的動物處死后立即取缺血梗死的組織，放在干凈的培養(yǎng)皿中，用OCT包埋劑（推薦ABC6077）將組織包裹并置于-20℃速凍30-60 min，如不能及時制備冰凍切片，需轉(zhuǎn)入-80℃保存。染色前，組織室溫稍微解凍后用十分鋒利的刀片將組織制成切片，厚度2-3 mm，需確保切面整齊。

染色步驟

      1. TTC染液經(jīng)37℃預熱30 min。

      2. 組織切片放入潔凈容器內(nèi)（注意不能使組織受到擠壓），加TTC染液浸沒組織，容器置于37℃水浴鍋中，避光染色約30 min。期間每隔10 min輕輕晃動組織使其均勻接觸染色液，并及時觀察染色情況。

      3. 當組織出現(xiàn)深紅色后，倒出TTC染液（可回收使用），向容器內(nèi)緩慢加入固定液（推薦ABC1119）浸沒組織終止染色反應。樣本需避光保存。

      4. 拍照前取出組織，用濾紙吸干固定液，根據(jù)需要用照相機拍照。

注意事項

      1. 取材時需迅速，確保樣本新鮮及最大程度保證酶活性。

      2. 染色后的樣本易褪色，需盡快拍照。

      3. 操作時請穿實驗服并佩戴一次性手套。