国产精品亚洲片在线va_日本香蕉视频ww_午夜大胆性人体_亚洲中文字幕网

      PI，即碘化丙啶，是一種溴化乙啶的類似物，能夠與DNA強力結(jié)合，它在嵌入雙鏈DNA后釋放紅色熒光，實現(xiàn)對DNA或細胞核的染色。PI不能穿透完整細胞膜，但能穿透凋亡晚期細胞及死細胞的破損細胞膜，利用該特點，PI通常與Calcein-AM或FDA等熒光探針聯(lián)合使用，進行活死細胞染及觀察色，或采用流式細胞儀相對定量檢測細胞凋亡（apoptosis）及細胞周期。PI-雙鏈DNA復合物的最大激發(fā)波長為535nm，最大發(fā)射波長為615nm。

      本產(chǎn)品PI染色液為即用型，PI濃度為100 μg/mL，可直接用于壞死細胞或組織的細胞核染色，以及細胞懸液用此染液染色后可以用于流式細胞儀檢測細胞周期。

儲存與運輸

      冰袋（wet ice）運輸；2-8℃避光保存，有效期6個月。

使用方法

      流式細胞儀檢測細胞周期操作步驟：

      1. 培養(yǎng)好的活細胞經(jīng)消化、PBS洗滌、低速離心收集得到細胞沉淀。

      2. 向細胞沉淀中緩慢加入1-3 mL -20℃預冷的90%乙醇，重懸細胞，冰浴過夜。

      3. 1500轉(zhuǎn)離心5min收集細胞，以PBS重懸，再次離心，去除上清液。

      4. 加入250 μL PBS重懸細胞。

      5. 加入2 μL濃度為1 mg/mL的RNase A（推薦ABC3423、ABC3431），37℃水浴40 min。

      6. 加入50 μL PI染液，避光孵育20 min（時間可根據(jù)實驗材料的染色結(jié)果調(diào)整）。

      7. 流式細胞儀檢測。

      熒光顯微鏡觀察活死細胞操作步驟：

      1. 培養(yǎng)好的貼壁細胞，去除培養(yǎng)基，用PBS清洗2次。

      2. 將PI染液用PBS稀釋10-20倍，配制成至終濃度為5-10 μg/mL的PI染色工作液。向孔板內(nèi)加入適量PI染色工作液覆蓋細胞，室溫避光孵育5-10 min。

      3. 棄去染色工作，加入PBS覆蓋細胞，熒光顯微鏡觀察。死細胞或凋亡晚期細胞的核呈紅色熒光。

注意事項

      1. 熒光染料都存在淬滅的問題，建議染色后盡量當天完成檢測。

      2. 操作時請穿實驗服，并佩戴一次性手套。