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      革蘭氏染色法是微生物學(xué)中廣泛使用的一種鑒別染色法，可用來區(qū)分革蘭氏陽性菌（G+）和革蘭氏陰性菌（G-），基本原理是基于細(xì)菌細(xì)胞壁化學(xué)組分不同。細(xì)菌經(jīng)結(jié)晶紫初染和碘液媒染后，在細(xì)胞壁內(nèi)形成不溶于水的結(jié)晶紫-碘復(fù)合物。革蘭氏陽性細(xì)菌由于細(xì)胞壁較厚，不含類脂，富含肽聚糖并交聯(lián)形成致密網(wǎng)格結(jié)構(gòu)，在用乙醇處理時肽聚糖網(wǎng)孔收縮，能將結(jié)晶紫-碘復(fù)合物阻留在細(xì)胞壁內(nèi)，使其呈現(xiàn)結(jié)晶紫的紫色。而革蘭氏陰性細(xì)菌因其細(xì)胞壁薄，肽聚糖含量低且交聯(lián)松散。遇乙醇時富含類脂的外膜溶解，在細(xì)胞壁上出現(xiàn)較大縫隙，結(jié)晶紫-碘復(fù)合物流出，因此經(jīng)乙醇脫色后細(xì)胞又成無色。此時再經(jīng)番紅復(fù)染，革蘭氏陰性細(xì)菌將被染成紅色。

      本產(chǎn)品革蘭氏染色液，包含四個組分，分別是草酸銨結(jié)晶紫染色液，1%碘溶液，脫色液和復(fù)紅染色液。經(jīng)染色后，革蘭氏陽性菌呈紫色至藍(lán)紫色，革蘭氏陰性菌呈紅色。

儲存與運輸

      常溫保存與運輸；有效期12個月。

使用方法

      1. 石蠟切片脫蠟至水；細(xì)菌涂片自然干燥或酒精燈略加溫干燥固定。

      2. 初染：滴加結(jié)晶紫染色液覆蓋樣本染色10-30 s，水洗，甩干水分。

      3. 媒染：滴加1%碘溶液覆蓋樣本染色1-1.5 min，水洗，甩干水分。

      4. 脫色：滴加脫色液從載玻片一端沖洗組織進(jìn)行脫色，直至流下的脫色液不再出現(xiàn)紫色為止，立即水洗去除脫色液。注意控制脫色時間。

      5. 復(fù)染：滴加復(fù)紅染色液染色20-60 s，水洗。用濾紙吸干邊緣水分。

      6. 細(xì)菌涂片可直接鏡檢觀察。組織切片經(jīng)60℃烤干后，經(jīng)無水乙醇快速脫水三次，分別1 s、3 s、5 s。然后經(jīng)二甲苯透明5 min，最后以中性樹膠封片，鏡檢。

注意事項

      1. 試劑使用完后及時擰緊瓶蓋，防止溶劑揮發(fā)。

      2. 細(xì)菌涂片過厚、結(jié)晶紫染色時間過長、脫色不足等可能導(dǎo)致假陽性結(jié)果；細(xì)菌涂片熱固定過度、脫色過度可能導(dǎo)致假陰性結(jié)果。建議同時做陰性菌和陽性菌對照組。

      3. 每套染色液大約可用于30張切片的染色（滴染）。

      4. 操作時請穿實驗服，并佩戴一次性手套。