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      Masson三色染色法又稱馬松染色，是一種較經(jīng)典的膠原纖維染色方法。該方法利用不同大小分子量的陰離子生物染料在結(jié)締組織中的滲透性不同，分子量小的染料易穿透結(jié)構(gòu)致密、滲透性低的組織，分子量大的染料只能進(jìn)入結(jié)構(gòu)疏松、滲透性好的組織，使不同的組織成分呈現(xiàn)不同的顏色。

      本產(chǎn)品Masson三色染色液為套裝，主要成分如下：A液是2.5%重鉻酸鉀媒染劑，B液與C液等體積混合后為Weigert鐵蘇木素染液，D液是麗春紅酸性品紅，E液是1%磷鉬酸溶液，F(xiàn)液是2.5%苯胺藍(lán)溶液。結(jié)締組織切片經(jīng)Masson三色染色液染色后，膠原纖維呈天藍(lán)色至亮深藍(lán)色，肌纖維、胞質(zhì)、纖維素、角質(zhì)白等呈紅色至紫紅色，紅細(xì)胞呈淺紅色。

儲存與運(yùn)輸

      常溫保存，有效期12個(gè)月。

使用方法

      1. 切片準(zhǔn)備：石蠟切片脫蠟至水；-20℃保存的冰凍切片需靜置恢復(fù)至室溫。

      2. 切片進(jìn)入Masson A液中室溫浸泡過夜（約15個(gè)小時(shí)）。

      3. 切片浸泡于Masson A液內(nèi)于65°烤箱內(nèi)孵育30 min，自來水洗30 s至組織上黃色褪去即可。同時(shí)將Masson D液及Masson F液放于65°烤箱內(nèi)預(yù)熱。

      4. 將Masson B液與Masson C液等體積混合（現(xiàn)配現(xiàn)用，不可提前配制保存），切片入混合液內(nèi)浸染1 min，流水稍洗。

      5. 切片經(jīng)1%鹽酸酒精（濃鹽酸：無水乙醇=1：100）分化1 min左右，至細(xì)胞核呈灰黑色，背景幾乎無色或淡灰色。

      6. 自來水稍洗，稍稍瀝干切片上的多余水分，切片入Masson D液浸染6 min，此時(shí)組織呈現(xiàn)亮紅色，如果紅色過淺可適當(dāng)延長染色時(shí)間。如果是冰凍切片（8 μm），染色時(shí)間縮短至3 min。然后切片經(jīng)自來水流水沖洗20 s左右，至切片上流下的水為無色。

      7. 切片稍微瀝干水分（不能干片），入Masson E液浸泡約1 min。此步為分化作用，分化到膠原纖維呈淺紅色，纖維呈紅色即可，可根據(jù)染色深淺需要自行調(diào)整E液的時(shí)間，一般1-2 min。

      8. 切片稍微瀝干Masson E液后，不經(jīng)水洗，直接入Masson F液染色，常規(guī)組織一般2-30 s；骨組織30 s，皮膚組織60 s。如果是冰凍切片（8 μm）染色時(shí)間需要適當(dāng)縮短，根據(jù)染色程度進(jìn)行調(diào)整。

      9. 切片經(jīng)連續(xù)三缸1%冰醋酸水溶液漂洗分化，毎缸7 s左右，目的是將多余的苯胺藍(lán)分化。第三缸1%冰醋酸水溶液漂洗時(shí)鏡檢，避免藍(lán)色過度分化。

      10. 切片經(jīng)連續(xù)三缸無水乙醇依次脫水約3 s，5 s，5 s。經(jīng)二甲苯透明5 min，中性樹膠封片。

注意事項(xiàng)

      1. 冬季溫度較低，Masson A液、Masson D液和Masson F液等建議加熱后使用，相應(yīng)的染色時(shí)間也需要調(diào)整。

      2. Masson A液處理后，切片水洗的時(shí)間不宜過長，會導(dǎo)致染色效果整體偏淡偏暗。

      3. Masson E液可以重復(fù)使用，如果染液明顯變色則需要更換新的。

      4. 操作時(shí)請穿實(shí)驗(yàn)服，佩戴一次性手套。