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      油紅O又名蘇丹紅5B，是一種脂溶性偶氮染料。該染料能特異性使細胞或組織內(nèi)的甘油三脂等中性脂質(zhì)著色，對于磷脂和類固醇等染色較弱，基本原理是油紅O溶于脂質(zhì)中使脂質(zhì)呈現(xiàn)紅色至橘紅色。

      本產(chǎn)品飽和油紅O染液，是油紅O的飽和溶液，使用前經(jīng)蒸餾水稀釋后，可用于組織切片或細胞的染色，染色后組織內(nèi)的脂滴呈紅色至橘紅色。

儲存與運輸

      常溫避光保存與運輸，有效期12個月。

使用方法

      l 配制工作液：臨用前，6份飽和油紅O染液與4份蒸餾水充分混合均勻，4℃靜置過夜，第二天后用定性濾紙過濾一次，在4℃放置24h再過濾第二次，得到油紅O工作液。另外，需自備60%異丙醇。

      l 樣本準備

      1. 對于細胞：吸棄細胞培養(yǎng)液，向孔板邊緣緩慢加入PBS（推薦ABC4220）簡單清洗細胞。加入4%多聚甲醛固定液（推薦ABC1119）室溫固定8-10 min，PBS漂洗2次。

      2. 對于冰凍切片：切片從-20℃取出后室溫靜置5-10 min恢復至常溫。

      l 染色步驟

      1. 對于細胞

      （1）向孔板內(nèi)加入少量60%異丙醇覆蓋細胞15-20 s，吸棄60%異丙醇，稍微晾干水分。

      （2）向孔板內(nèi)加入油紅O工作液覆蓋細胞，室溫避光染色30 min，去除染色液。

      （3）加入60%異丙醇快速分化3-5 s，純水洗3次，每次5 min。

      （4）（可選）加入蘇木素染液（推薦ABC1022）對細胞核進行染色，水洗，返藍再水洗。

      （5）加入PBS覆蓋細胞后顯微鏡觀察。如果是細胞爬片，可用甘油明膠封片劑（推薦ABC1420）封片。

      2. 對于冰凍切片

      (1) 恢復至室溫的冰凍切片輕輕浸入油紅O工作液浸染8-10 min（加蓋避光）。

      (2) 取出切片，停留3 s后依次浸入兩缸60%異丙醇分化3-5 s。

      (3) 切片依次浸入兩缸純水中浸洗，每次10 s。

      (4) （可選）切片浸入蘇木素染液對細胞核進行染色，水洗，返藍再水洗，稍微晾干水分后滴加甘油明膠封片劑封片。

注意事項

      1. 如果是新鮮組織冰凍切片，需要對切片先固定后再染色。

      2. 整個操作過程中注意動作輕緩，以免脂肪丟失或者移位。

      3. 油紅O染色后的樣本不能長期保存，應盡快觀察及拍照。

      4. 用甘油明膠封片劑封片時需注意，盡量避免產(chǎn)生氣泡，如果封片后有氣泡不能按壓玻片或強行撕扯蓋玻片，否則會造成脂肪移位。可將玻片浸入50-60℃溫水中，讓蓋玻片自行脫落，然后重新封片。

      5. 本產(chǎn)品大約可用于80張切片的染色。當組織或細胞著色明顯偏淺或顏色異常時請更換新的染液。

      6. 為了您的安全和健康，操作時請穿實驗服并佩戴一次性手套。