400-830-9659
產(chǎn)地:ABC
貨號(hào):ABC1255
規(guī)格:1G
備注:將蛋白消化成小的片段,促進(jìn)DNA與蛋白的分離,使提取的DNA純度更高;不含DNase、RNase
Proteinase K(蛋白酶K)是一種切割活性較廣的絲氨酸蛋白酶,可切割脂肪族氨基酸和芳香族氨基酸的羧基端肽鍵。Proteinase K應(yīng)用廣泛,常見(jiàn)于分子生物學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)、免疫組化等相關(guān)實(shí)驗(yàn)中用于消化各種蛋白,例如制備脈沖電泳的染色體DNA、去除DNA和RNA制備中的核酸酶、蛋白質(zhì)印跡、組織細(xì)胞通透等實(shí)驗(yàn)。常用濃度的EDTA、Triton X-100、Tween 20、Sarkosyl、鹽酸胍對(duì)Proteinase K的活力影響不大,而變性劑如SDS(1%)可提高其活性,Proteinase K常用工作濃度為50-100 μg/mL,根據(jù)所用緩沖液中是否含有SDS、尿素以及pH、溫度等因素確定具體的工作濃度。
Proteinase 本產(chǎn)品Recombinant Proteinase K為白色至類(lèi)白色凍干粉,利用來(lái)源于Tritirachium album Limber(林伯氏白色念球菌)的絲氨酸蛋白酶基因,經(jīng)定點(diǎn)突變改造并通過(guò)畢赤酵母菌株重組表達(dá)、純化、凍干,不含DNase、RNase,分子量約30 kDa,經(jīng)SDS-PAGE檢測(cè)純度≥95%。重組表達(dá)的突變體Proteinase K比野生型酶性能更優(yōu),其在寬廣的pH和溫度范圍都能保持酶活性,有效的pH范圍為pH 7.0-11,最佳pH為pH 10左右;有效的溫度范圍為30-65℃,最佳反應(yīng)溫度為55℃,在50℃-60℃可以保持90%的酶活性,65℃仍然能夠保持85%左右的酶活性。
Proteinase 在37℃、pH 7.5條件下,以酪蛋白為底物,1分鐘水解釋放1 μmol酪氨酸所需酶量定義為一個(gè)酶活性單位。本司生產(chǎn)的Recombinant Proteinase K比活力(Specific activity)≥30 U/mg。
儲(chǔ)存與運(yùn)輸
冰袋(wet ice)運(yùn)輸;-20℃保存,24個(gè)月有效。
使用說(shuō)明
Proteinase K凍干粉復(fù)溶:稱(chēng)取適量?jī)龈煞郏扑]使用含20 mM Tris-HCl, 50 mM NaCl, 50% Glycerol, 5 mM CaCl2, pH 7.5的緩沖液完全溶解后儲(chǔ)存于-20℃,可保存至少6個(gè)月。
注意事項(xiàng)
1. 由于該P(yáng)roteinase K酶活性高、穩(wěn)定性好,應(yīng)注意避免實(shí)驗(yàn)交叉污染。
2. 為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
本產(chǎn)品僅供科研用途,不用于臨床診斷!
(產(chǎn)品包裝升級(jí)中,以實(shí)物為準(zhǔn)。)
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