400-830-9659
產(chǎn)地:ABC
貨號(hào):ABC3439
規(guī)格:200U
備注:增加體外轉(zhuǎn)錄RNA產(chǎn)量、增加PCR反應(yīng)中DNA產(chǎn)量、去除利用焦磷酸鹽測(cè)定法進(jìn)行SNP基因分型的試劑中的PPi污染物等
本產(chǎn)品Inorganic Pyrophosphatase (Thermostable),即耐熱無機(jī)焦磷酸酶,來源于Thermococcus litoralis,是一種催化一分子焦磷酸鹽轉(zhuǎn)化為兩分子磷酸鹽離子的酶(P2O7-4+H2O+PPase → 2HPO4-2)。PPase催化的反應(yīng)是一個(gè)高放能的反應(yīng),在自然條件下,PPase可以為蛋白、RNA、DNA的生物合成提供熱力學(xué)動(dòng)力,并在脂代謝、鈣吸收等生物轉(zhuǎn)化過程中發(fā)揮作用。本產(chǎn)品主要用途:增加體外轉(zhuǎn)錄RNA產(chǎn)量、增加PCR反應(yīng)中DNA產(chǎn)量、去除利用焦磷酸鹽測(cè)定法進(jìn)行SNP基因分型的試劑中的PPi污染物等。Inorganic Pyrophosphatase (Thermostable)與Inorganic Pyrophosphatase (E.coli)、Inorganic Pyrophosphatase (Yeast)相比熱穩(wěn)定性強(qiáng),100℃處理2 h仍具有60%以上的酶活性。
來源:來源于Thermococcus litoralis,大腸桿菌重組表達(dá)。
酶活定義:在標(biāo)準(zhǔn)反應(yīng)條件下,每分鐘水解PPi產(chǎn)生1 μmol Pi所需的酶量定義為一個(gè)酶活單位。(標(biāo)準(zhǔn)反應(yīng)條件:500 μL體系中包含100 mM Tris-HCl, 2 mM MgCl2, 2 mM PPi, pH 8.0;75℃反應(yīng)10 min)
純度及濃度:SDS-PAGE檢測(cè)純度≥95%;2 U/μL。
酶儲(chǔ)存緩沖液:20 mM Tris-HCl, 100 mM NaCl, 1 mM DTT, 0.1 mM EDTA, 50% Glycerol, pH 8.0。
圖1. ABC3439 Inorganic Pyrophosphatase (Thermostable)的熱穩(wěn)定性效果圖。將Inorganic Pyrophosphatase (Thermostable)分別在100℃條件下孵育0 min、10 min、30 min、1 h、2 h、4 h、5 h后,在最適條件下測(cè)定其酶活結(jié)果如圖所示,從圖中可以看出在100℃條件下處理2 h Inorganic Pyrophosphatase (Thermostable)依然保持60%以上的活性。
儲(chǔ)存與運(yùn)輸
冰袋(wet ice)運(yùn)輸;-20℃保存,12個(gè)月有效。
操作步驟
1. 該產(chǎn)品在多種反應(yīng)體系中均有活性,通常在體外RNA轉(zhuǎn)錄、PCR、HAD擴(kuò)增、LAMP擴(kuò)增等實(shí)驗(yàn)中,可以直接取適量Inorganic Pyrophosphatase (Thermostable)加入到反應(yīng)體系中。
2. 該酶的用量在不同的實(shí)驗(yàn)中需要優(yōu)化,通常在0.05~1 U/mL終濃度中進(jìn)行調(diào)整;
注意事項(xiàng)
1. 酶制品使用時(shí)應(yīng)放在冰盒內(nèi)或冰浴,使用完畢后應(yīng)立即放置于-20℃保存,建議分裝保存。
2. 為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
本產(chǎn)品僅供科研用途,不用于臨床診斷!
(產(chǎn)品包裝升級(jí)中,以實(shí)物為準(zhǔn)。)
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