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番紅O是一種可結(jié)合多陰離子的陽離子染料,能與軟骨中組織中的多糖陰離子基團(tuán)例如硫酸軟骨素、硫酸角質(zhì)素等結(jié)合使其呈紅色。并且番紅O著色與陰離子的濃度近似成正比關(guān)系,能間接反映軟骨基質(zhì)中蛋白多糖的含量及分布。如果軟骨受到損傷,軟骨中的糖蛋白會丟失,表現(xiàn)為番紅O淡染或不著色。酸性染料固綠則與組織中的嗜酸性成分結(jié)合使其呈綠色或藍(lán)色。番紅固綠聯(lián)合染色實現(xiàn)軟骨組織與骨組織的區(qū)分。
本產(chǎn)品骨組織番紅固綠染液,番紅染液濃度為0.2%,固綠染液濃度為2%。適用于骨組織染色。經(jīng)染色后,軟骨呈紅色至鮮紅色,成骨呈綠色至藍(lán)綠色。
儲存與運輸
常溫保存于運輸,有效期12個月。
使用方法
1. 石蠟切片脫蠟至水:切片依次經(jīng)二甲苯脫蠟10 min,更換新鮮的二甲苯脫蠟10 min,無水乙醇 5min,新鮮無水乙醇5 min,90%乙醇5 min,75%乙醇5 min,自來水洗。
2. 固綠染色:切片進(jìn)入骨組織固綠染液染色1-5 min,自來水流水沖洗多余染液至軟骨呈無色,經(jīng)1%鹽酸酒精快速處理10-15 s,自來水稍洗。
3. 番紅染色:切片進(jìn)入骨組織番紅染液染色5-10 s,然后經(jīng)四缸無水乙醇快速脫水,每次3-5 s,第四次脫水后鏡檢,至軟骨著紅色,背景無色。
4. 透明封片:切片經(jīng)二甲苯透明5 min,再經(jīng)新鮮二甲苯透明5 min,然后以中性樹膠封片。
5. 顯微鏡鏡檢,圖像采集分析。
注:自備二甲苯、梯度乙醇、中性樹膠等。
注意事項
1. 切片經(jīng)番紅染色時間不宜過長,否則很難分化,導(dǎo)致與固綠顏色混雜。如果需要重新染色時,可以用自來水浸泡去除固綠顏色,酸性分化液(推薦ABC1057)浸泡去除番紅顏色,將顏色全部脫色后再重新進(jìn)行染色。
2. 固綠染色后水洗可去除多余染料,通過鏡下觀察成骨呈明顯綠色、軟骨著色很淺或無色控制水洗時間。
3. 操作時請穿實驗服,并佩戴一次性手套。
本產(chǎn)品僅供科研用途,不用于臨床診斷!
(產(chǎn)品包裝升級中,以實物為準(zhǔn)。)
軟骨呈鮮紅色,成骨呈綠色。
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