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      IP裂解液是一種在非變性條件下裂解細(xì)胞或組織制備蛋白樣品的裂解液。經(jīng)本裂解液裂解組織或細(xì)胞得到的蛋白樣本，可應(yīng)用于PAGE，western blot，免疫沉淀(Immunol Precipitation，IP)、免疫共沉淀(co-IP)、ChIP（Chromatin Immunopre-cipitation）和ELISA等對蛋白保持活性有要求的實驗。

      本產(chǎn)品主要成分為25 mM Tris-HCl，150 mM NaCl，1 mM EDTA及1% NP-40。可適用于動物或植物組織及細(xì)胞樣品，也可用于真菌或細(xì)菌樣品。

儲存與運輸

      冰袋（wet ice）運輸；2-8℃避光保存，有效期12個月。

使用方法

自備蛋白酶抑制劑。IP裂解液在臨用前需加入蛋白酶抑制劑，推薦ABC2024、ABC2025、ABC2026等，防止蛋白降解。以下使用方法中提到的IP裂解液均指已添加蛋白酶抑制劑。

對于組織樣品：

      1. 組織塊用預(yù)冷PBS（推薦ABC4220）洗滌，去除血污，剪成細(xì)小碎塊置于勻漿器中。

      2. 加入10倍組織體積IP裂解液低溫勻漿（推薦ABC自主研發(fā)生產(chǎn)的高速組織研磨儀）。注意，IP裂解液的使用量可按照約每50 mg組織與1 mL裂解液的比例添加。如組織蛋白含量較低，可降低裂解液的用量，以提高粗提溶液中的蛋白濃度。

      3. 將勻漿液轉(zhuǎn)移至1.5 mL離心管中，振蕩。冰浴30 min，期間每10 min用移液器反復(fù)吹打，確保組織細(xì)胞完全裂解；

      4. 12000 g離心5 min，收集上清，即為總蛋白溶液。

對于貼壁細(xì)胞樣品：

      1. 用PBS清洗細(xì)胞2-3次，最后一次徹底吸干殘留液。

      2. 按照6孔板每孔細(xì)胞250 μL裂解液的比例吸取IP裂解液于細(xì)胞培養(yǎng)板、瓶內(nèi)，反復(fù)晃動培養(yǎng)板、瓶，使裂解液與細(xì)胞充分接觸3-5 min。

      3. 用細(xì)胞刮刀將細(xì)胞刮下，收集到離心管中。

      4. 12000 g離心5 min，收集上清，即為總蛋白溶液。

對于懸浮細(xì)胞樣品：

      1. 離心收集細(xì)胞。

      2. 按照6孔板每孔細(xì)胞250 μL裂解液的比例將細(xì)胞液與IP裂解液混合，振蕩。

      3. 冰浴30 min，期間每10 min用移液器反復(fù)吹打數(shù)次，確保細(xì)胞完全裂解。

      4. 12000 g離心5 min，收集上清，即為總蛋白溶液。

對于細(xì)菌或真菌樣本：

      1．取1 mL菌懸液，離心去上清，PBS洗滌一次，充分去除液體。渦旋使菌體盡量分散。

      2．加入100-200 μL IP裂解液，輕輕渦旋使菌體與裂解液充分混勻。

      3．冰浴10 min，期間每2 min用移液器反復(fù)吹打數(shù)次，確保菌體完全裂解。

      4．12000 g離心5 min，收集上清，即為總蛋白溶液。

注意事項

      1. 組織或細(xì)胞裂解時可能會出現(xiàn)粘稠狀。可用移液器反復(fù)吹打或渦旋儀振蕩，直至呈液狀為止。如果一直較稠，可再加入適量裂解液。

      2. 本試劑不含有蛋白酶抑制劑，需自備蛋白酶抑制劑并在臨用前加入。推薦使用本公司的ABC2024、ABC2025、ABC2026等相關(guān)蛋白酶抑制劑。

      3. 操作時請穿實驗服，并佩戴一次性手套。