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  • SDS-PAGE 凝膠快速制備試劑盒50T (ABC2055)
SDS-PAGE 凝膠快速制備試劑盒50T (ABC2055)
價(jià)格:190.0

產(chǎn)地:ABC

貨號(hào):ABC2055

規(guī)格:50T

備注:1、可做任意濃度 2、可單獨(dú)補(bǔ)充上層膠指示染料

  • SDS-PAGE 凝膠快速制備試劑盒50T (ABC2055)
產(chǎn)品簡(jiǎn)介

      本產(chǎn)品SDS-PAGE凝膠快速制備試劑盒,包含凝膠制備所需的所有試劑,用戶只需準(zhǔn)備少量純水及制膠設(shè)備(制膠底座、玻璃板、梳子等),根據(jù)說(shuō)明書(shū)操作即可在短時(shí)間內(nèi)制得所需凝膠。本試劑盒可制備常規(guī)大小凝膠至少50塊。

儲(chǔ)存與運(yùn)輸

      冰袋(wet ice)運(yùn)輸;改良型促凝劑-20℃保存,其他2-8℃避光保存,有效期12個(gè)月。

使用方法

      1. 根據(jù)目的蛋白分子量和所選電泳緩沖液不同,選擇合適濃度的SDS-PAGE下層膠,參照表格如下:

SDS-PAGE分離膠濃度 最佳分離范圍(kDa)
(Tris-Glycine電泳緩沖液,ABC2036)
最佳分離范圍(kDa)
(SWE快速高分辨電泳緩沖液,ABC2099)
6% 50-300 15-300
8% 30-130 10-250
10% 20-100 5-150
12% 10-60 3-100
15% <40 <60

      2. 根據(jù)目標(biāo)蛋白分子量大小,選取分離膠的濃度,以常用規(guī)格8.3 cm×7.3 cm凝膠板(單塊)為例,可參考下表配制制膠液:

分離膠濃度 6% 8% 10% 12% 15%
玻璃板厚度(mm) 0.75 1.0 1.5 0.75 1.0 1.5 0.75 1.0 1.5 0.75 1.0 1.5 0.75 1.0 1.5
所需制膠液總體積(mL)* 4.0 6.0 8.0 4.0 6.0 8.0 4.0 6.0 8.0 4.0 6.0 8.0 4.0 6.0 8.0
H2O(mL) 2.16 3.24 4.32 1.89 2.84 3.78 1.63 2.44 3.25 1.36 2.04 2.72 0.96 1.44 1.92
30%丙烯酰胺(29:1)(mL) 0.8 1.2 1.6 1.07 1.6 2.14 1.33 2.0 2.67 1.6 2.4 3.2 2.0 3.0 4.0
4×Tris-SDS分離膠緩沖液(mL) 1.0 1.5 2.0 1.0 1.5 2.0 1.0 1.5 2.0 1.0 1.5 2.0 1.0 1.5 2.0
改良型促凝劑(μL) 40 60 80 40 60 80 40 60 80 40 60 80 40 60 80
TEMED(μL) 2.0 3.0 4.0 2.0 3.0 4.0 2.0 3.0 4.0 2.0 3.0 4.0 2.0 3.0 4.0

*制膠液總體積不包含TEMED的體積。

      3. 濃縮膠配制可參考下表:

濃縮膠濃度(%) 5%
H2O/mL 1.75 2.63 3.5 5.25
30%丙烯酰胺(29:1)/mL 0.5 0.75 1.0 1.5
4×Tris-SDS濃縮膠緩沖液/mL 0.75 1.13 1.5 2.25
改良型促凝劑/μL 18 27 36 54
TEMED/μL 4.0 6.0 8.0 12.0
總體積*/mL 3.0 4.5 6.0 9.0

*總體積不包含TEMED的體積。

      4. 推薦電泳條件:

            a. 使用SWE快速高分辨電泳緩沖液(ABC2099)進(jìn)行電泳:200-250 V恒壓,25-35 min可完成電泳;

            b. 使用Tris-Glycine電泳緩沖液(ABC2036)進(jìn)行電泳:設(shè)置電壓上層膠90 V,電泳約30 min(marker進(jìn)入分離膠);下層膠調(diào)整電壓為150-180 V,約60-90 min(可根據(jù)實(shí)際情況調(diào)整)。

注意事項(xiàng)

      1. 所有試劑使用前需要提前復(fù)溫至室溫后方可使用。

      2. 改良型促凝劑相較于過(guò)硫酸銨(AP)穩(wěn)定性更好,使用時(shí)拿出一支,使用結(jié)束后于4℃保存,以便后續(xù)常規(guī)使用,可保存六個(gè)月;若長(zhǎng)期不用請(qǐng)放置于-20℃保存,避免反復(fù)凍融。

      3. 小于10 kDa的蛋白分離建議使用Tricine膠,丙烯酰胺凝膠可能不足以分離。

      4. 溫度對(duì)于膠的凝固時(shí)間影響較大,為保證實(shí)驗(yàn)順利進(jìn)行,一般溫度越低,凝固時(shí)間越長(zhǎng),可適當(dāng)增加改良型促凝劑用量;溫度越高凝膠越快,可適當(dāng)減少改良型促凝劑用量。

      5. 凝膠需要充分的凝固時(shí)間,建議膠制好充分靜置確保凝膠徹底。

      6. 當(dāng)溫度較低時(shí),10%SDS溶液有結(jié)晶析出,于37℃復(fù)溫融化后可繼續(xù)使用。

      7. 如需快速制膠試劑,可購(gòu)買(mǎi)本公司其他產(chǎn)品,如SDS-PAGE凝膠快速制備試劑盒(ABC2055),或超快速彩色凝膠配制試劑盒系列(ABC2059/ABC2060/ABC2061/ABC2062/ABC2063,ABC2078/ABC2079/ABC2080/ABC2081/ABC2082),及高分辨超快速彩色凝膠配制試劑盒系列(ABC2084/ABC2085/ABC2086,ABC2089/ABC2090/ABC2091),可滿足不同實(shí)驗(yàn)需求

      8. 為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

本產(chǎn)品僅供科研用途,不用于臨床診斷!

(產(chǎn)品包裝升級(jí)中,以實(shí)物為準(zhǔn)。)

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