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      本試劑盒提供了簡單而又快速的15% PAGE彩色(紅色)凝膠配制試劑，能夠同時制備下層膠(即分離膠)和上層膠(也稱濃縮膠、積成膠)，用戶只需準備制膠設(shè)備，即可快速制備蛋白凝膠。同時，試劑盒中上層膠溶液B中含有紅色染料，使得蛋白點樣孔清晰呈現(xiàn)，實現(xiàn)了加樣過程的可視化，極大的提高了加樣效率。該紅色染料可在上層膠中穩(wěn)定存在，不會隨著電泳而遷移至下層膠，不會影響電泳和染色效果，電泳完成后也便于識別上層膠并切除，不影響后續(xù)Western Blot等實驗。本試劑盒制備的凝膠也可用于非變性PAGE凝膠電泳。

      本試劑盒可制備常規(guī)尺寸的凝膠50塊，具體配制的凝膠塊數(shù)量與凝膠的厚薄以及凝膠的大小有關(guān)。

儲存與運輸

      冰袋（wet ice）運輸；改良型促凝劑-20℃保存，其他2-8℃避光保存，有效期12個月。

操作步驟

      1. 根據(jù)目的蛋白分子量和所選電泳緩沖液不同，選擇合適濃度的PAGE下層膠，參照表格如下：

      2. 根據(jù)實驗需求，等比例混合溶液A和B，加入適量的改良型促凝劑，分別配制下層膠溶液、上層膠溶液。不同規(guī)格以及不同厚度的玻璃板可以等比例調(diào)整上層膠和下層膠溶液的配制體積，以常用規(guī)格8.3 cm×7.3 cm凝膠板（單塊）為例，推薦配制體系如下表格：

      3. 裝配好凝膠制具，先加入配制好的下層膠溶液，然后使用蒸餾水或乙醇等溶液封住下層膠液面，待下層膠凝固充分（約10-15min）后，棄去水或者乙醇，并用濾紙吸干殘留的水或者乙醇，再加入配制好的上層膠溶液，插入梳子，待其凝固（約10-15min）后即可使用；也可在加入配置好的下層膠溶液后立即緩慢均勻的加入配制好的上層膠溶液，插入梳子，待其凝固（約10-15min）后即可使用；

      4. 配制完成的凝膠如不能當天使用，可4℃保存1-2天。

      5. 推薦電泳條件：

            a. 使用SWE快速高分辨電泳緩沖液（ABC2099）進行電泳：200-250 V，25-35 min；

            b. 使用Tris-Glycine電泳緩沖液（ABC2036）進行電泳：上層膠90 V，約30 min（marker進入分離膠）；下層膠150-180 V，約60-90 min(可根據(jù)實際情況調(diào)整)。

注意事項

      1. 改良型促凝劑相較于過硫酸銨（AP）穩(wěn)定性更好，使用時拿出一支，使用結(jié)束后于4℃保存，以便后續(xù)常規(guī)使用，可保存六個月；若長期不用請放置于-20℃保存，避免反復凍融。

      2. 上層膠溶液B長時間靜置容易產(chǎn)生絮狀沉淀，使用前請輕輕顛倒混勻。

      3. 預混液中存在單體丙烯酰胺，對人體有害，操作時請注意做好防護措施。

      4. 為了保證樣本同時進入分離膠，直接灌制上層膠時需緩慢均勻的加入配制好的上層膠溶液。

      5. 加入改良型促凝劑之后盡快灌制凝膠，請勿長時間放置。

      6. 溫度對于膠的凝固時間影響較大，為保證實驗順利進行，一般溫度越低，凝固時間越長，可適當增加改良型促凝劑用量；溫度越高凝膠越快，可適當減少改良型促凝劑用量。

      7. 如需進一步加快凝膠速度，臨配膠前可按需補充適量TEMED，同時增加0.5倍改良型促凝劑使用量。

      8. 本公司同時提供其他彩色（綠色、黃色、藍色）上層膠溶液，以區(qū)別不同樣本不同凝膠電泳。

      9. 為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。