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本產(chǎn)品以考馬斯亮藍R250為染料,不含有毒的甲醇,主要用于蛋白電泳聚丙烯酰胺凝膠的常規(guī)染色及脫色。染色液主要成分為考馬斯亮藍R250;脫色液主要成分為無水乙醇和冰醋酸。
保存條件
常溫保存與運輸,有效期12個月。
操作說明
常規(guī)染色脫色方法:
1. 電泳結(jié)束后,取出聚丙烯酰胺凝膠放入適量的考馬斯亮藍染液R250中,以染液剛好覆蓋凝膠為宜。
2. 在水平搖床上室溫染色4-12 h,也可以適當(dāng)提高溫度以減少染色時間。
3. 倒出染液,加入適量的考馬斯亮藍脫色液覆蓋凝膠,室溫下脫色4-12 h,直到凝膠背景干凈,可以看到較清晰的深藍色蛋白條帶為止。期間需更換脫色液。
常規(guī)染色脫色方法:
1. 電泳結(jié)束后,取出聚丙烯酰胺凝膠先放入蒸餾水中潤洗兩次,加入適量的考馬斯亮藍染液R250,以染液剛好覆蓋凝膠為宜。放入微波爐中加熱至接近沸騰,立即停止加熱。若溶液煮沸容易導(dǎo)致凝膠破損碎裂。
2. 隨后在染色液較高溫度的情況下,水平搖床上染色5 min左右,直到能夠看到清晰的蛋白條帶為止。
3. 倒出染液,加入適量的考馬斯亮藍脫色液覆蓋凝膠,放入微波爐中低火加熱至接近沸騰,立即停止加熱。同理,因溶液沸騰容易導(dǎo)致凝膠破損碎裂。
4. 在保持脫色液較高溫度的情況下,水平搖床脫色20-30 min,期間可更換2-3次脫色液,經(jīng)微波爐加熱和搖動脫色,直到藍色背景基本全部脫去,蛋白條帶達到預(yù)期的染色結(jié)果為止。
5. 完成脫色后可將凝膠保存在水中或20%甘油水溶液中,盡快拍照。如需要長期保存可制備干膠。
注意事項
1. 考馬斯亮藍染液R250可回收反復(fù)使用。
2. 對于膠濃度小于10%的膠,操作時要小心,避免出現(xiàn)膠碎裂的情況。
3. 如使用快速染色脫色方法,因染色液及脫色液中含有乙醇,務(wù)必使用微波爐低火加熱,注意安全。
4. 操作時請穿實驗服,佩戴一次性手套。
本產(chǎn)品僅供科研用途,不用于臨床診斷!
(產(chǎn)品包裝升級中,以實物為準(zhǔn)。)
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