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      本產(chǎn)品是一種靈敏度較高的化學(xué)發(fā)光試劑盒，基本原理是以luminol為基礎(chǔ)的化學(xué)發(fā)光；可與二抗上偶聯(lián)的辣根過氧化物酶（horseradish peroxidase, HRP）發(fā)生反應(yīng)而發(fā)光，通過X-光膠片曝光或其他成像方法（如熒光或化學(xué)發(fā)光成像儀）進行檢測；檢測極限為納克級，可滿足大部分目的蛋白的曝光實驗需求。

保存條件

      冰袋（wet ice）運輸；2-8℃避光保存，有效期12個月。

操作步驟

      1. 將ECL A液和ECL B液等體積混合制成ECL工作液，室溫配制，現(xiàn)配現(xiàn)用；

      2. Western Blot實驗中PVDF膜（或NC膜）經(jīng)二抗孵育后，多次洗滌，濾紙吸去多余液體；將膜放在兩片潔凈保鮮膜（或PE手套）中間，加入ECL工作液覆蓋膜表面，此過程應(yīng)小心完成，避免膜與膜之間產(chǎn)生氣泡；

      3. 充分反應(yīng)之后，用濾紙或吸水紙吸去多余的ECL工作液，隨后進行壓片檢測或是熒光成像儀檢測；

      4. 壓完的膠片用顯影、定影試劑（推薦ABC2037，ABC2041，ABC2042）進行顯影和定影（若為熒光成像儀曝光忽略此步驟）；根據(jù)發(fā)光強度調(diào)整曝光條件；

注意事項

      1. ECL A液和B液吸液過程中務(wù)必更換槍頭，避免A液、B液交叉污染，致使活性成分失效。

      2. 在與膜發(fā)生接觸過程中，請佩戴手套且使用干凈鑷子等潔凈器材，避免外源蛋白質(zhì)及金屬離子污染。

      3. 疊氮化鈉會抑制HRP的活性，所有相關(guān)試劑應(yīng)避免使用。

      4. ECL工作液配置完成后請于一天內(nèi)使用完，請勿留置到第二天，以免影響實驗結(jié)果的準確性。

      5. 各溶液使用后，請蓋緊瓶蓋避光保存，以防失效；特別是B液，含有氧化劑，容易被還原而失效。

      6. ECL化學(xué)發(fā)光試劑盒選擇參照附表一，一抗及二抗推薦稀釋比測試數(shù)據(jù)均來自自研抗體。

      7. ECL化學(xué)發(fā)光檢測常見問題及解決方案參照附表二。

      8. ECL化學(xué)發(fā)光試劑盒A/B液均對人體有害，操作時務(wù)必小心，注意有效防護，避免直接接觸人體或吸入呼吸道。

      9. 為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。

附表一：ECL化學(xué)發(fā)光試劑盒選擇參照表

附表二：ECL化學(xué)發(fā)光檢測常見問題及解決方案