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      聚凝胺（Polybrene）也稱Hexadimethrine Bromide (海美溴銨)，是一類多聚陽離子聚合物，溶解后帶正電，可與細(xì)胞表面陰離子結(jié)合，常用于慢病毒、腺病毒等病毒介導(dǎo)的哺乳動物細(xì)胞感染，可顯著提高慢病毒、腺病毒對某些細(xì)胞的感染效率。其作用機理可能是通過中和細(xì)胞表面唾液酸與病毒顆粒之間的靜電排斥從而促進(jìn)吸附作用。聚凝胺也是一種有名的抗肝素劑（肝素拮抗劑），常用來生產(chǎn)非特異性凝集的紅細(xì)胞。另外聚凝胺也多用于蛋白測序，因為小劑量的聚凝胺在自動測序分析可明顯改善多肽的降解現(xiàn)象。PVDF膜加入聚凝胺還能提高膜的親和性。本產(chǎn)品主要成分濃度為10 mg/mL，經(jīng)微孔濾膜過濾除菌。

儲存與運輸

      冰袋(wet ice)運輸；4℃保存，12個月有效；-20℃保存，24個月有效。

操作步驟

      1. 根據(jù)實驗需求，提前將細(xì)胞種植于孔板中，于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)過夜；

      2. 參考相關(guān)文獻(xiàn)或預(yù)實驗所得MOI值，用完全培養(yǎng)基稀釋病毒原液到所需濃度，并添加聚凝胺（10 mg/mL），使聚凝胺最終濃度在2-12 μg/mL（聚凝胺最常用濃度為5-8 μg/mL）；

      3. 吸除原有的培養(yǎng)基，將病毒液-培養(yǎng)基-聚凝胺混合液加入到孔板中，輕輕搖勻后，于培養(yǎng)箱中孵育；

      4. 孵育6-16 h后，吸除含病毒的培養(yǎng)基，更換為正常的培養(yǎng)基，于培養(yǎng)中繼續(xù)培養(yǎng)（病毒孵育的時間根據(jù)具體情況而定，如細(xì)胞狀態(tài)良好，可適當(dāng)延長孵育時間；反之，則需要提前更換為正常培養(yǎng)基）；

      5. 根據(jù)實驗?zāi)康?，培養(yǎng)一定時間后，對細(xì)胞進(jìn)行收集或檢測。

注意事項

      1. 不同細(xì)胞對聚凝胺的敏感性不同，初次實驗，建議先做細(xì)胞毒性檢測。

      2. 如-20°存放，建議適當(dāng)分裝，避免反復(fù)凍融。

      3. 為了您的健康和安全，操作時請穿好實驗服、戴好手套。

      4. 不同的細(xì)胞耐受性、敏感性不一樣，轉(zhuǎn)染孵育時間長短，以及PEI/DNA使用比例，可視情況酌情調(diào)整。

      5. 操作時請穿實驗服，佩戴一次性手套。