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產(chǎn)品信息

產(chǎn)品描述

谷胱甘肽（谷氨酰-半胱氨酰-甘氨酸）是一種由3個氨基酸殘基組成的小肽，廣泛存在于機體中。谷胱甘肽以還原型谷胱甘肽（GSH）和氧化型谷胱甘肽（GSSG）兩種不同的形式存在，并且可以在一定條件下互相轉(zhuǎn)換。GSH是動物細(xì)胞中重要的抗氧化劑，且是絕大多數(shù)細(xì)胞巰基的主要來源。在生理條件下，由于GSSG會被谷胱甘肽還原酶酶促還原，因此，GSH是機體內(nèi)主要存在形式。

本試劑盒根據(jù)還原型谷胱甘肽可與DTNB反應(yīng)產(chǎn)生TNB和GSSG的原理，TNB是一種黃色產(chǎn)物，通過測量其在412 nm的吸光度，就能有效確定樣品GSH含量。

儲存與運輸

冰袋運輸；-20℃避光保存，6個月有效。

試劑盒組成

操作步驟

1. 樣品準(zhǔn)備：

1.1. 樣品前處理

1.1.1. 血漿、血清樣品：加入等體積的蛋白去除試劑，充分混勻；4℃，10000 g 離心 10-15 min，取上清用于后續(xù)還原型谷胱甘肽檢測；

1.1.2. 組織樣品：添加蛋白去除試劑到組織中進(jìn)行勻漿裂解（重量g：體積mL為1：9）；勻漿裂解后，4℃，10000 g 離心 10-15 min，取上清用于后續(xù)還原型谷胱甘肽檢測；

1.1.3. 細(xì)胞樣品：細(xì)胞收集后，使用蛋白去除試劑重懸細(xì)胞，大約每1 X 10⁷個細(xì)胞加100-200 μL 試劑，對其進(jìn)行超聲或冰上裂解；處理后，4℃，10000 g 離心 10-15 min，取上清用于后續(xù)還原型谷胱甘肽檢測；

注意：由于高濃度蛋白去除試劑會影響檢測，上述樣品建議使用超純水稀釋后用于后續(xù)檢測，確保蛋白去除試劑最終含量不高于10。

1.2. 標(biāo)準(zhǔn)品配置和準(zhǔn)備：

1.2.1. 還原型谷胱甘肽標(biāo)準(zhǔn)品（粉末）在低速離心機上離心，確保粉末都在管底；使用500 μL無菌超純水溶解，配制成還原型谷胱甘肽標(biāo)準(zhǔn)品（1mmol/L），建議分裝后-20℃保存，1個月內(nèi)用完；

1.2.2. 蛋白去除試劑和超純水1：9的比例進(jìn)行混合，并用其對還原型谷胱甘肽標(biāo)準(zhǔn)品（1mmol/L）進(jìn)行梯度稀釋（例如可設(shè)置為50/25/12.5/6.25/3.125 μmol/L），與待測樣品進(jìn)行后續(xù)檢測后，用于標(biāo)準(zhǔn)曲線法數(shù)據(jù)分析。

2. 還原型谷胱甘肽檢測：

2.1. 將檢測探針和超純水1：19混合配置成檢測探針工作液（建議現(xiàn)配現(xiàn)用）；

2.2. 參考下表進(jìn)行還原型谷胱甘肽檢測；

3. 數(shù)據(jù)分析：

3.1. 標(biāo)準(zhǔn)曲線法：

3.1.1. 根據(jù)梯度稀釋的標(biāo)準(zhǔn)組值-空白組值數(shù)據(jù)使用Excel等軟件繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線：Y=a X+ b；

3.1.2. 樣品還原型谷胱甘肽含量計算：

Y為標(biāo)準(zhǔn)組值-空白組值；X為還原型谷胱甘肽含量；a為標(biāo)準(zhǔn)曲線斜率；b為標(biāo)準(zhǔn)曲線截距；ΔA為：樣品組值-空白組值；2^*為血清和蛋白去除試劑混合后稀釋的倍數(shù)；V為勻漿裂解組織或細(xì)胞使用的蛋白去除試劑的體積（mL）；m為組織濕重（g）；n為細(xì)胞量（10⁶個）；f為稀釋倍數(shù)。

注意事項

1. 使用前充分溶解并輕輕晃動各類試劑，確保各成分均勻條件下使用。

2. 初次使用可視情況適當(dāng)分裝儲存，以避免反復(fù)凍融影響試劑性能。

3. 蛋白去除試劑會影響勻漿后樣品上清液的BCA檢測。如需測定蛋白含量，需另取同批組織。 

4. 標(biāo)準(zhǔn)品換算法分析數(shù)據(jù)時，需待測樣品和標(biāo)準(zhǔn)品濃度處于試劑盒線性檢測量程內(nèi)；標(biāo)準(zhǔn)曲線法分析數(shù)據(jù)時，確保標(biāo)準(zhǔn)曲線R²＞0.99。

5. 還原劑以及巰基活性化合物會嚴(yán)重干擾本試劑盒的測定。

6. 為了您的健康和安全，操作時請穿好實驗服、戴好手套。

附錄：技術(shù)參數(shù)

本產(chǎn)品僅供科研用途，不用于臨床診斷！

（產(chǎn)品包裝升級中，以實物為準(zhǔn)。）