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      本試劑盒提供了簡(jiǎn)單而又快速的12% PAGE高分辨彩色(紅色)凝膠配制試劑，能夠同時(shí)制備下層膠(即分離膠)和上層膠(也稱濃縮膠、積成膠)，用戶只需準(zhǔn)備制膠設(shè)備，即可快速制備蛋白凝膠。試劑盒中上層膠溶液中含有紅色染料，使得蛋白點(diǎn)樣孔清晰呈現(xiàn)，實(shí)現(xiàn)了加樣過(guò)程的可視化，極大的提高了加樣效率。凝膠可200 V恒壓電泳，僅需30 min即可完成電泳過(guò)程，相較于傳統(tǒng)的凝膠電泳體系耗時(shí)更短，且分辨率更高。本試劑盒制備的凝膠也可用于非變性PAGE凝膠電泳。

      本方法配制時(shí)無(wú)需自行添加TEMED，僅需改良型促凝劑即可形成凝膠，大大減少了TEMED對(duì)人體和環(huán)境的危害。本產(chǎn)品為改良型Bis-Tris配方凝膠，需與配套電泳緩沖液使用，不能使用Tris-Glycine電泳緩沖液。具體配制的凝膠塊數(shù)量與凝膠的厚薄以及凝膠的大小有關(guān)。

儲(chǔ)存與運(yùn)輸

      冰袋（wet ice）運(yùn)輸；改良型促凝劑-20℃保存，25×Tris-MOPS SDS-PAGE電泳緩沖液室溫保存，其他2-8℃避光保存，有效期12個(gè)月。

操作步驟

      1. 根據(jù)目的蛋白分子量大小選擇合適濃度的PAGE下層膠（分離膠），參照表格如下：

      2. 根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求，等比例混合溶液A和B，加入適量的改良型促凝劑，分別配制下層膠溶液、上層膠溶液。不同規(guī)格以及不同厚度的玻璃板可以等比例調(diào)整上層膠和下層膠溶液的配制體積，以常用規(guī)格8.3 cm×7.3 cm凝膠板（單塊）為例，推薦配制體系如下表格：

      3. 裝配好凝膠制具，先加入配制好的下層膠溶液，然后使用蒸餾水或乙醇等溶液封住下層膠液面，待下層膠凝固充分（約10-15min）后，棄去水或者乙醇，并用濾紙吸干殘留的水或者乙醇，再加入配制好的上層膠溶液，插入梳子，待其凝固（約10-15min）后即可使用；也可在加入配置好的下層膠溶液后立即緩慢均勻的加入配制好的上層膠溶液，插入梳子，待其凝固（約10-15min）后即可使用；

      4. 配制完成的凝膠如不能當(dāng)天使用，可4℃保存1-2天。

      5. 電泳前將BTT電泳緩沖液（25×）稀釋成1×電泳緩沖液即可（電泳緩沖液不建議重復(fù)使用超過(guò)2次）；

      6. 電泳時(shí)可全程200 V恒壓電泳，一般30分鐘左右即可完成電泳。

注意事項(xiàng)

      1. 改良型促凝劑相較于過(guò)硫酸銨（AP）穩(wěn)定性更好，使用時(shí)拿出一支，使用結(jié)束后于4℃保存，以便后續(xù)常規(guī)使用，可保存六個(gè)月；若長(zhǎng)期不用請(qǐng)放置于-20℃保存，避免反復(fù)凍融。

      2. 預(yù)混液中存在單體丙烯酰胺，對(duì)人體有害，操作時(shí)請(qǐng)注意做好防護(hù)措施。

      3. 為了保證樣本同時(shí)進(jìn)入分離膠，直接灌制上層膠時(shí)需緩慢均勻的加入配制好的上層膠溶液。

      4. 加入改良型促凝劑之后盡快灌制凝膠，請(qǐng)勿長(zhǎng)時(shí)間放置。

      5. 如需進(jìn)一步加快凝膠速度，可增加0.5倍改良型促凝劑使用量。

      6. 溫度對(duì)于膠的凝固時(shí)間影響較大，為保證實(shí)驗(yàn)順利進(jìn)行，一般溫度越低，凝固時(shí)間越長(zhǎng)，可適當(dāng)增加改良型促凝劑用量；溫度越高凝膠越快，可適當(dāng)減少改良型促凝劑用量。

      7. 本公司同時(shí)提供其他彩色（綠色、黃色、藍(lán)色）上層膠溶液，以區(qū)別不同樣本不同凝膠電泳。

      8. 本試劑盒制成的凝膠不能兼容Tris-Glycine電泳緩沖體系，只能與套裝內(nèi)Tris-MOPS SDS-PAGE電泳緩沖液配套使用，另提供Tris-MOPS SDS-PAGE電泳緩沖液（25×）單品，見(jiàn)ABC2068。