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      本試劑盒利用超順磁性磁珠高效吸附核酸的特性，再配合特別優(yōu)化的緩沖體系，通過添加不同比例的分選液，可進(jìn)行200 bp-1500 bp DNA片段的純化與分選，整個操作過程簡單、快捷，可對PCR體系、酶切體系的DNA純化等，通過分選獲得的DNA片段可廣泛應(yīng)用于NGS（Next Generation Sequencing）文庫構(gòu)建。

      冰袋（wet ice）運(yùn)輸，2-8℃儲存；有效期12個月。

      1. 使用前請配置80%乙醇，最好現(xiàn)配現(xiàn)用。

      2. 自備磁力架。

一、DNA片段純化步驟

1. 提前將DNA片段分選試劑從2-8℃取出，使其溫度恢復(fù)至室溫；

2. 上下顛倒DNA片段分選試劑，使磁珠分散均勻，向DNA樣品中加入1.8倍體積的DNA片段分選試劑，用移液器輕輕吹打至磁珠分散均勻，室溫靜置5 min，期間使用移液器吹打混勻2-3次；

3. 將離心管置于磁力架上30 s，待上清清澈后，吸棄上清；

4. 加入200 μL 80%的乙醇，移開磁力架，使用移液器吹打至磁珠分散均勻，將離心管移至磁力架上靜置30 s，待上清清澈后，吸棄上清；

5. 重復(fù)步驟4；

6. 將離心管蓋打開，室溫晾干5-10 min，使乙醇完全揮發(fā)（避免磁珠過度干燥，以免影響核酸得率）；

7. 移去磁力架，向離心管加入20-50 μL Buffer TE或Nuclease-free Water，使用移液器吹打至磁珠分散均勻，室溫靜置5 min；

8. 將離心管移至磁力架上至磁珠全部吸附至管壁，吸取上清至一新的離心管中，即得高純度的DNA。

二、DNA片段分選步驟

1. 提前將DNA片段分選試劑從2-8℃取出，使其溫度恢復(fù)至室溫；

2. 第一次結(jié)合：上下顛倒DNA片段分選試劑，使磁珠分散均勻，根據(jù)需要得到的片段范圍按照表1加入第一次片段分選試劑用量；

3. 用移液器輕輕吹打至磁珠分散均勻，室溫靜置5 min，期間使用移液器吹打混勻2-3次；

4. 將離心管置于磁力架上30 s，待上清清澈后，將上清轉(zhuǎn)移至一新的離心管中；

備注：樣本量×第一次分選試劑用量比例=分選液加入量，如100 μL樣本× 0.6=60 μL分選液；

5. 第二次結(jié)合：根據(jù)表1向上述離心管中加入0.1倍樣體積的DNA片段分選試劑；

備注：樣本量×第二次片段分選試劑用量比例=分選液加入量，如100 μL樣本× 0.1=10 μL分選液；

6. 用移液器輕輕吹打至磁珠分散均勻，室溫靜置5 min，期間使用移液器吹打混勻2-3次；

7. 將離心管置于磁力架上30 s，待上清清澈后，吸棄上清；

8. 加入200 μL 80%的乙醇，移開磁力架，使用移液器吹打混勻，將離心管移至磁力架上靜置30 s，待上清清澈后，吸棄上清；

9. 重復(fù)步驟8；

10. 將離心管蓋打開，室溫晾干5-10 min，使乙醇完全揮發(fā)（避免磁珠過度干燥，以免影響核酸得率）；

11. 去掉磁力架，向離心管加入30-50 μL Buffer TE或Nuclease-free Water，使用移液器輕輕吹打至磁珠分散均勻，室溫靜置5 min；

12. 將離心管移至磁力架上至磁珠全部吸附至管壁，吸取上清至一新的離心管中，即得高純度的DNA。

表1：DNA片段分選推薦分選液用量表

1. 操作之前，請務(wù)必認(rèn)真閱讀本產(chǎn)品說明書。

2. DNA片段分選樣本量低于100 μL，可加水補(bǔ)至100 μL，樣本量過少易使磁珠實(shí)際加入量不準(zhǔn)，進(jìn)而影響分選效果。

3. 磁珠易沉淀，使用前務(wù)必混勻。

4. 磁珠懸液在保存過程中避免冷凍。

5. 洗脫前，應(yīng)使乙醇完全揮發(fā)，避免殘留的乙醇影響下游實(shí)驗(yàn)。

6. 請勿長時間干燥磁珠，以免影響DNA洗脫效率。

7. 為了您的安全和健康，請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。