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      DRAQ5是一種遠紅外熒光活細胞 DNA 染料，是一種對雙鏈 DNA 具有高親和力的蒽醌染料。親脂性的熒光探針，可以自由透過活細胞（組織）和固定細胞（組織）的細胞膜及核膜，從而達到快速標記 DNA 的目的。同時，DRAQ5 也是水溶性的，可直接使用，無需細胞裂解和洗滌步驟，使用簡便，可滿足自動化需求。由于 DNA 染色是量化的，因此 DRAQ5 可應用于細胞增殖研究中的 DNA 含量分析。由于其遠紅外的激發(fā)和發(fā)射光譜特性，DRAQ5可與其它多種熒光探針聯(lián)合使用，是細胞表達綠色熒光蛋白（GFP）融合蛋白的理想選擇。該探針與現(xiàn)今市面上眾多的儀器平臺兼容。

      細胞水平的熒光檢測方法，如流式細胞術(shù)、in-cell ELISA（ICE）、熒光顯微鏡以及高內(nèi)涵成像技術(shù)需要熒光標記來識別單個細胞。當使用多個熒光探針來觀察細胞靶點及活動時，每個探針必須具有不同于其他探針的熒光光譜。DNA 結(jié)合性藍色熒光探針，例如 Hoechst 和 DAPI 是最常用到的細胞核熒光探針；但當缺乏 UV 照射儀或同時使用其他藍色光譜熒光探針時，這類探針卻不能使用。因此，不同于這些藍色光譜的細胞核探針對于細胞鑒別、計數(shù)，以及確定核形態(tài)及 DNA 含量等應用領域是具有重要意義的。

產(chǎn)品信息

      分子式：C22H28N4O4

      分子量：412.49

      CAS 號：254098-36-7

      激發(fā)波長范圍：647/680nm

實驗步驟

      注意：由于不需要洗滌的步驟，因此 DRAQ5 的染色通常在其它染色實驗完成后進行。另外，在檢測培養(yǎng)基中加入 DRAQ5，即可用于活細胞的檢測。

      1. 制備磷酸鹽緩沖液（PBS，不含疊氮化鈉），或為特定細胞準備的特殊培養(yǎng)基。

      2. 對于懸浮細胞，用 PBS 或培養(yǎng)基重懸細胞，注意細胞密度不超過 4×105 cells/ml。

      注意：對于貼壁細胞，根據(jù)細胞融合度估算細胞密度；對于組織切片，根據(jù)切片尺寸估計細胞數(shù)。

      3. 用 PBS（或培養(yǎng)基）按 1:1000 的比例稀釋 DRAQ5，直接滴加到組織切片或細胞中。

      4. 輕輕混勻使染液分布均勻，室溫避光孵育 5-30 分鐘（具體時間根據(jù)不同的細胞類型進調(diào)整）。如需在 37℃環(huán)境孵育，需將孵育時間縮短至 1-3 分鐘，因為在 37 攝氏度時 DRAQ5 染色的進度會明顯加快。

      注意：因熒光容易淬滅，需要在避光環(huán)境中孵育。

      5. 無需洗滌或進一步處理即可直接觀察。

案例分析

注意事項

      避免反復凍融，建議適當分裝。

      使用前請先高速離心數(shù)秒，使液體充分沉降到管底。

      存放及操作時盡量注意避光，以減緩熒光的淬滅。

      為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。

      由于激發(fā)波長范圍很寬，不建議與其他可被 488/633 nm 激光激發(fā)的遠紅光熒光染料聯(lián)用。