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      Green live-cell nucleic acid stain是一種具有細胞膜通透性的綠色核酸染料，與核酸結(jié)合之后熒光強度會顯著增強。Green live-cell nucleic acid stain可以對真核細胞（包括活細胞和死細胞）的 DNA 和 RNA 染色，同樣適用于細菌（包括革蘭氏陽性菌與陰性菌）。

產(chǎn)品特點

      良好的細胞膜通透性，可以穿過幾乎所有類型細胞的細胞膜，包括哺乳動物細胞與細菌。

      摩爾吸光系數(shù)高，最大可見吸收光譜的消光系數(shù)>60,000 cm-1 M-1。

      熒光背景信號低，與核酸結(jié)合前，染料的量子產(chǎn)率通常<0.01。

      與核酸結(jié)合后，量子產(chǎn)率通常>0.4。

      Green live-cell nucleic acid stain可以在不同實驗中對活細胞或者經(jīng)過固定的細胞樣品中的核酸進行染色，與激光激發(fā)器和常規(guī)的寬頻照明光源等熒光檢測儀器匹配。

實驗步驟

      注意：我們推薦的染料工作濃度是基于已有文獻與自身實驗室經(jīng)驗，客戶應(yīng)根據(jù)具體的細胞類型和實驗系統(tǒng)對染料的最佳工作濃度進行優(yōu)化。

      1. 用塑料試管稀釋 Green live-cell nucleic acid stain（因為稀釋后的染料對玻璃有附著性）。如果希望獲得最佳的染色效果，最好不要使用含有磷酸鹽成分的緩沖液。配制實驗中其它所需試劑時，注意用去離子水將塑料管壁或玻璃管壁上殘留的去污劑盡量清洗干凈，否則即使在沒有細胞存在也會引起很強的背景信號與非特異性染色。染料工作濃度請參考附表 1。（請注意：培養(yǎng)基，細胞密度，細胞類型等因素均會對染色效果產(chǎn)生影響。）

      2. 對于貼壁細胞可以在鋪板時放入玻片，然后直接在玻片上對細胞樣品染色；對于懸浮細胞，需要對細胞懸液離心，然后用緩沖液將細胞重懸后進行染色。

      3. 參考附表 1 的濃度加入 Green live-cell nucleic acid stain 染色液，若要獲得最佳染色效果，請按附表 1 中的推薦濃度進行濃度梯度稀釋染色預(yù)實驗。

      4. 在真核細胞中通?？梢杂^察到彌漫性的胞漿和細胞核染色，經(jīng)?？梢杂^察到強烈染色核內(nèi)小體。

      5. 由于Green live-cell nucleic acid stain具有細胞膜透性，在中性 pH 條件下帶一個凈正電荷，因而亦可以對線粒體染色，活酵母染色主要就是對線粒體染色。

      6. Green live-cell nucleic acid stain可用于 DNA 微陣列檢測的染色質(zhì)量控制。

案例分析

      表1 推薦染色條件

注意事項

      為避免反復(fù)凍融，建議適當(dāng)分裝。

      對于微量的液體，每次使用前先離心數(shù)秒鐘，使液體充分沉降到管底。

      熒光染料均存在淬滅問題，請盡量注意避光，以減緩熒光淬滅。

      為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。