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      本試劑盒通過利用離心吸附柱技術(shù)和特有的的裂解緩沖體系，可安全、快速、高效的提取多種簡單植物組織基因組DNA。植物樣本經(jīng)液氮完全研磨后與裂解液充分混合，能夠快速釋放基因組DNA，提取操作僅在1小時內(nèi)完成。本試劑盒可從50-100 mg的植物組織中提取純化得到1-10 μg的高純度基因組DNA，提取的基因組DNA可用于PCR擴(kuò)增、酶切反應(yīng)、Southern雜交以及RAPD、AFLP、RFLP等多種常規(guī)分子生物學(xué)實驗。

      RNase A冰袋（wet ice）運輸，-20℃保存；其余試劑常溫運輸，常溫儲存；有效期12個月。

1. 超低溫凍存的植物樣本避免反復(fù)凍融，否則會導(dǎo)致提取的DNA質(zhì)量與產(chǎn)量下降。

2. Buffer PGL1如有沉淀出現(xiàn)，使用前請于65℃加熱，直至沉淀消失，混勻即可使用。

3. 使用前請向Buffer PD和Buffer PW中加入指定量（見瓶身）的無水乙醇。

1. 植物組織樣本裂解：

      a. （推薦）取新鮮或超低溫凍存的植物組織50-100 mg，迅速轉(zhuǎn)移到裝有2-3顆3 mm的研磨珠（推薦ABC0221-150G）并用液氮預(yù)冷的2.0 mL RNase-Free研磨管（推薦ABC-200-M）中，將研磨管置于研磨儀（推薦ABC901001）上（放置研磨管前將適配器于液氮中迅速預(yù)冷）進(jìn)行研磨，直至研磨成粉末狀（如果沒有完全研磨成粉末狀，會影響DNA得量和質(zhì)量）。然后加入400 μL Buffer PGL1和6 μL RNase A，使用移液器吹打至裂解液中無明顯沉淀，室溫靜置10 min。

      b. 取新鮮或超低溫凍存的植物組織50-100 mg，迅速轉(zhuǎn)移到用液氮預(yù)冷的1.5 mL RNase-free離心管中，加入液氮，用研杵研磨組織，其間不斷加入液氮，直至樣本研磨成粉末狀（如果樣本沒有完全研磨成粉末狀，會影響DNA得量和質(zhì)量）。然后加入400 μL Buffer PGL1和6 μL RNase A，使用移液器吹打至裂解液中無明顯沉淀，室溫靜置10 min。

      c. 取新鮮或超低溫凍存的植物組織50-100 mg，迅速轉(zhuǎn)移到用液氮預(yù)冷的研缽中，加入液氮，用研杵研磨組織，其間不斷加入液氮，直至研磨成粉末狀（如果沒有完全研磨成粉末狀，會影響DNA得量和質(zhì)量），將研磨成粉末狀的樣本加入到含有400 μL Buffer PGL1和6 μL RNase A的1.5 mL RNase-free離心管中，使用移液器吹打至裂解液中無明顯沉淀，室溫靜置10 min。

2. 向離心管中加入130 μL Buffer PGL2，使用移液槍吹打混勻，冰上放置5 min；

3. 12,000 rpm離心5 min，將上清轉(zhuǎn)移至一新的離心管中；

4. 向離心管中加入與上清液等體積的Buffer PD，上下顛倒混勻；

5. 將DNA Spin Column安置于Collection Tube上，并將上述混合液轉(zhuǎn)移至DNA Spin Column中。每次加入量不超過600 μL，如果超過600 μL可分批加入；

6. 12,000 rpm離心30 s，棄掉濾液。將DNA Spin Column重新放回Collection Tube中；

7. 向DNA Spin Column中加入600 μL Buffer PW（請沿管壁加入Buffer PW，有助于沖洗管壁上殘留的鹽分）12,000 rpm離心30 s，棄掉廢液；

8. 重復(fù)操作步驟7；

9. 將DNA Spin Column放入Collection Tube中，12,000 rpm離心2 min；

10. 將DNA Spin Column置于一新的1.5 mL的離心管中，室溫放置3-5 min，使DNA Spin Column殘留的乙醇完全揮發(fā)；

11. 向DNA Spin Column的膜中央加入50-100 μL Buffer TE或Nuclease-free Water，室溫放置5 min（將Buffer TE或Nuclease-free Water加熱至65℃有利于提高洗脫效率）；

12. 12,000 rpm離心2 min，收集DNA。若要得到更高濃度的DNA，也可以將第一次的洗脫液重新加回至DNA Spin Column中，室溫靜置5 min，12,000 rpm離心2 min，再次收集DNA。

1. 盡量使用新鮮植物組織，以確?；蚪MDNA的得率與完整性。

2. 提取的DNA若要長期保存，請用Buffer TE洗脫，并于-80℃保存。

3. 得到的基因組DNA避免多次反復(fù)凍融。

本試劑盒對多種植物樣本基因組DNA提取量見下表，基因組DNA的提取量和植物種類、部位以及生長狀態(tài)有關(guān)，樣本推薦用量如下表。