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      本試劑盒通過特別優(yōu)化的裂解緩沖液，釋放組織細胞中的基因組DNA，再通過專一結合DNA的離心吸附柱純化基因組DNA，適用于動物組織、培養(yǎng)細胞以及全血基因組DNA提取?？蓮?-30 mg的動物組織、10⁶-10⁷新鮮培養(yǎng)的細胞懸液以及5-100 μL無核或有核紅細胞全血（含抗凝劑），快速提取純化10-30 μg高純度完整的基因組DNA，獲得的基因組DNA可直接用于后續(xù)PCR模板、酶切、雜交等分子生物學實驗。

      Proteinase K和RNase A冰袋（wet ice）運輸，-20℃保存；其余試劑室溫運輸，室溫儲存；有效期12個月。

1. Buffer GA如有沉淀現象，請于65℃加熱溶解，待恢復至室溫后使用。

2. 使用前請向Buffer PD加入18 mL的無水乙醇，向Buffer PW中加入56 mL的無水乙醇。

1. 樣本處理：

a. 取新鮮或超低溫凍存的動物組織2-30 mg，置于裝有2-3顆3 mm研磨珠（推薦ABC0221-150G）的1.5 mL離心管或專用研磨管中，加入200 μL Buffer GA，使用組織研磨儀（推薦ABC901001）在常溫條件下將組織徹底研磨至勻漿狀（如果組織沒有被徹底勻漿，將會影響DNA的得率和質量）；

b. 取10⁶-10⁷細胞懸液，于1.5 mL離心管中，1,000 rpm離心5 min，使用移液器輕輕吸棄上清，向離心管中加入200 μL Buffer GA，使用渦旋振蕩器渦旋混勻；

c. 取50-100 μL無核紅細胞全血（含抗凝劑），于1.5 mL離心管中，補加Buffer GA至200 μL，使用渦旋振蕩器渦旋混勻（如果處理更大體積的血液，在樣本中加入3倍體積紅細胞裂解液（推薦ABC2033）顛倒混勻，室溫放置5 min，期間顛倒混勻2-3次，3000 rpm離心10 min，使用移液器輕輕吸棄上清，留下白細胞沉淀，然后加入200 μL Buffer GA，使用渦旋振蕩器渦旋混勻）；

d. 取5-20 μL有核紅細胞全血（含抗凝劑），置于1.5 mL離心管中，補加Buffer GA至200 μL，使用渦旋振蕩器渦旋混勻；

2. 加入20 μL Proteinase K和4 μL RNase A，56℃孵育30 min（每10 min渦旋混勻一次，可加速組織裂解），較難裂解的材料可以適當延長裂解時間；

3. 1,2000 rpm離心2 min，將組織上清液轉移至Nuclease-free離心管中，盡量避免吸取沉淀（如提取細胞/血液樣本基因組時，請忽略此步驟）；

4. 向離心管中加入200 μL Buffer GB，上下顛倒混勻，70℃放置10 min；

5. 向離心管中加入200 μL無水乙醇，上下顛倒混勻，此時可能會出現絮狀沉淀，12,000 rpm室溫離心2 min；

6. 將DNA Spin Column安置于Collection Tube上，并將上述上清液轉移至DNA Spin Column中；

7. 12,000 rpm離心30 s，棄掉濾液，將DNA Spin Column重新放回Collection Tube中；

8. 向DNA Spin Column中加入500 μL Buffer PD，12,000 rpm離心30 s，棄掉廢液；

9. 向DNA Spin Column中加入600 μL Buffer PW（請沿管壁加入Buffer PW，有助于沖洗管壁上殘留的鹽分），12,000 rpm離心30 s，棄掉廢液；

10. 重復步驟9；

11. 將DNA Spin Column放入Collection Tube中，12,000 rpm離心2 min；

12. 將DNA Spin Column置于一新的Nuclease-free 1.5 mL的離心管中，室溫放置3-5 min，使DNA Spin Column殘留的乙醇完全揮發(fā)

13. 向DNA Spin Column的膜中央加入50-100 μL Buffer TE或Nuclease-free Water，室溫放置5 min（將Buffer TE或Nuclease-free Water加熱至65℃有利于提高洗脫效率）；

14. 12,000 rpm離心2 min，收集DNA。若要得到更高濃度的DNA，也可以將第一次的洗脫液重新加回至DNA Spin Column中，室溫靜置5 min，12,000 rpm離心2 min，再次收集DNA。

1. 操作之前，請務必認真閱讀本產品說明書。

2. 應盡量使用新鮮的實驗材料，以確保提取的基因組DNA不被降解。

3. 樣品應避免反復凍融，否則會導致提取的DNA產量下降。

4. 組織材料切勿超過最大起始量，且要充分裂解，否則可能影響得率，甚至會堵塞吸附柱。