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      本試劑盒利用磁珠可逆的結(jié)合核酸的特性以及特有的緩沖體系，可快速、高效的純化PCR產(chǎn)物和酶切產(chǎn)物，還可從瓊脂糖凝膠中分離高純度的特定DNA片段。整個操作過程無需離心，僅30 min可回收80%以上的100 bp-10 kb的DNA片段。純化后的DNA片段可應(yīng)用于酶切反應(yīng)、連接反應(yīng)、PCR擴增、測序等分子生物學(xué)實驗。

儲存與運輸

      常溫運輸，常溫儲存；有效期12個月。

使用前準備

1. 使用前請向Buffer SPW中加入指定量（見瓶身）的無水乙醇。

2. 自備磁力架和1.5 mL滅菌的離心管。

實驗步驟

一、從瓊脂糖凝膠中回收DNA片段

1. 從瓊脂糖凝膠中切下含有特異的DNA條帶的凝膠塊，盡量除去多余部分（切膠時不要將膠塊長時間暴露于紫外燈下，防止DNA損傷）。將切下的凝膠塊放入1.5 mL滅菌的離心管中（盡量搗碎膠塊，有助于加快溶解），稱取重量；

2. 向離心管中加入一定量的Buffer SPS（例如切下的凝膠塊重量為0.1 g，則加入100 μL的Buffer SPS），60℃加熱5-10 min，期間不斷地上下顛倒離心管，直至膠塊完全溶解；

3. 向上一步所得的溶液中加入等體積的無水乙醇，使用移液器或渦旋儀混勻，再加入0.6倍PCR體積或酶切體積的SweMag Beads（SweMag Beads使用前需渦旋至分散均勻），使用移液器或渦旋儀混勻；

4. 室溫放置5 min，期間使用移液器或渦旋儀混勻2-3次，至磁珠分散均勻；

5. 將離心管移至磁力架上靜置30 s，直至磁珠完全吸附，將離心管隨磁力架溫和地上下顛倒數(shù)次，使管壁殘留的磁珠沖刷下來，待上清清澈后，吸棄上清（為避免影響提取效率，勿將磁珠吸出）；

6. 加入300 μL Buffer SPW，移開磁力架，用移液器輕輕吹打至磁珠分散均勻；將離心管移至磁力架上靜置30 s，再將離心管隨磁力架溫和地上下顛倒數(shù)次，使管壁殘留的磁珠和鹽分沖刷下來，待上清清澈后，吸棄上清（為避免影響提取效率，請務(wù)必吸盡離心管內(nèi)殘留的液體）；

7. 重復(fù)操作步驟6；

8. 將離心管蓋打開，室溫放置5–10 min或65℃放置3–5 min，使乙醇完全揮發(fā)（避免磁珠過度干燥，以免影響核酸得率）；

9. 移去磁力架，加入30–50 μL Buffer TE或Nuclease-free Water，用移液器輕輕吹打至磁珠分散均勻，室溫靜置3 min；

10. 將離心管置于磁力架上，直至磁珠完全吸附，吸取上清至一新的離心管中，即得高純度的DNA。

二、從PCR反應(yīng)液或酶切反應(yīng)液中回收DNA

1. 向PCR反應(yīng)體系或酶切反應(yīng)體系中加入2倍體積的Buffer SPS和無水乙醇，使用移液器或渦旋儀混勻，再加入0.6倍PCR反應(yīng)體積或酶切反應(yīng)體積的SweMag Beads（SweMag Beads使用前需渦旋至分散均勻），使用移液器或渦旋儀混勻；

2. 室溫放置5 min，期間使用移液器或渦旋儀混勻2-3次，至磁珠分散均勻；

3. 將離心管移至磁力架上靜置30 s，直至磁珠完全吸附，將離心管隨磁力架溫和地上下顛倒數(shù)次，使管壁殘留的磁珠沖刷下來，待上清清澈后，吸棄上清（為避免影響提取效率，勿將磁珠吸出）；

4. 加入300 μL Buffer SPW，移開磁力架，用移液器輕輕吹打至磁珠分散均勻；將離心管移至磁力架上靜置30 s，再將離心管隨磁力架溫和地上下顛倒數(shù)次，使管壁殘留的磁珠和鹽分沖刷下來，待上清清澈后，吸棄上清（為避免影響提取效率，請務(wù)必吸盡離心管內(nèi)殘留的液體）；

5. 重復(fù)操作步驟4；

6. 將離心管蓋打開，室溫放置5–10 min或65℃放置3–5 min，使乙醇完全揮發(fā)（避免磁珠過度干燥，以免影響核酸得率）；

7. 移去磁力架，加入30–50 μL Buffer TE或Nuclease-free Water，用移液器輕輕吹打至磁珠分散均勻，室溫靜置3 min；

8. 將離心管置于磁力架上，直至磁珠完全吸附，吸取上清至一新的離心管中，即得高純度的DNA。

注意事項

1. 操作之前，請務(wù)必認真閱讀本產(chǎn)品說明書。

2. 磁珠懸液在保存過程中應(yīng)避免冷凍。

3. 磁珠易沉淀，使用前應(yīng)搖勻或渦旋混勻。

4. 加入磁珠前，需要將其他試劑混合均勻。

5. 洗脫DNA前應(yīng)使乙醇完全揮發(fā)，避免殘留的乙醇影響下游實驗。

6. 請勿長時間干燥磁珠，以免影響DNA洗脫效率。

7. 為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。