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      本產(chǎn)品MTT檢測試劑盒，廣泛應用于細胞增殖和活性測定，以及藥物對細胞毒性的檢測。MTT全稱為3-(4,5-dimethyl-2-thiazolyl)-2,5-diphenyl-2-H-tetrazolium bromide，中文名噻唑藍。其檢測原理為活細胞線粒體中的琥珀酸脫氫酶能使外源底物MTT還原為不溶于水的藍紫色甲臜(Formazan)并沉積在細胞中，而死細胞無此功能。再利用二甲基亞砜(DMSO)溶解細胞中的甲臜沉積物，用酶標儀于490 nm或570 nm波長處測定其光吸收值，在一定細胞數(shù)范圍內(nèi)，甲臜形成的量與活細胞數(shù)成正比。根據(jù)測得的吸光度值(OD值)，來判斷活細胞數(shù)量，OD值越大，活細胞數(shù)越多，細胞活性越強(如果是測藥物毒性，則表示藥物毒性越小)。使用本試劑盒檢測細胞活性時，在進行反應后需吸除上清，因此不能用于懸浮細胞的檢測。如需檢測懸浮細胞，建議使用本公司其他產(chǎn)品（ABC4121 CCK-8試劑盒）。

儲存與運輸

      冰袋（wet ice）運輸；4℃避光保存，有效期3個月；或-20℃避光保存，有效期12個月，避免反復凍融。

操作步驟

      1. 貼壁細胞處理：待細胞貼壁后，按照實驗設(shè)計進行加藥、轉(zhuǎn)染等處理；

      2. 細胞活性檢測：每孔加入20 μL MTT工作液，在細胞培養(yǎng)箱內(nèi)孵育4 h；

      3. 去除上清：完成孵育后，會發(fā)現(xiàn)孔板底部出現(xiàn)少量紫色結(jié)晶，可在40倍顯微鏡下觀察。用移液槍小心吸除孔板內(nèi)上清溶液（切勿吸到底部紫色結(jié)晶）；

      4. 顯色：向孔板中加入100 μL DMSO，37℃孵育15 min左右（可用手指輕微敲擊板底小幅度震蕩），待紫色結(jié)晶全部溶解。如果紫色結(jié)晶較小較少，溶解的時間會短一些；如果紫色結(jié)晶較大較多，可適當延長溶解時間；

      5. 檢測：在波長490 nm或570 nm處測定吸光度。如無570 nm濾光片，可使用560-600 nm濾光片。

注意事項

      1. DMSO在較低溫度時會凝固，可于37℃復溶后不影響使用。

      2. 本試劑盒檢測原理是依賴于脫氫酶催化的反應，樣品中如有較多還原劑(例如一些抗氧化劑)會干擾檢測，需設(shè)法去除。

      3. 為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。