400-830-9659
產(chǎn)地:ABC
貨號:ABC4039
規(guī)格:100ml
備注:不僅可以替代傳統(tǒng)胰酶的功能,而且可用于嚴格要求使用無動物源性的特殊細胞或組織的消化。
胰蛋白酶(Trypsin)簡稱胰酶,是一種絲氨酸水解酶,能把多肽鏈中賴氨酸和精氨酸中的羧基端切斷。在組織細胞的提取、培養(yǎng),以及體外細胞培養(yǎng)過程中,均會使用到胰蛋白酶消化液,用于水解細胞間蛋白質(zhì),使組織或細胞離散成單個細胞。傳統(tǒng)胰蛋白酶取自豬、牛等動物胰臟。傳統(tǒng)胰酶的來源和生產(chǎn)工藝特性,決定了其不可避免的會含有動物源雜質(zhì)以及潛在病毒污染。本產(chǎn)品使用重組豬胰蛋白酶替代傳統(tǒng)胰蛋白酶。在生產(chǎn)制備過程中不使用任何動物源性原料,且通過多輪純化,確保重組豬胰蛋白酶純度以及活率。使其不僅可以替代傳統(tǒng)胰酶的功能,而且可用于嚴格要求使用無動物源性的特殊細胞或組織的消化。此外本產(chǎn)品含EDTA和酚紅指示劑。
4℃保存,即開即用,方便。
儲存與運輸
冰袋運輸;2-8℃避光保存,12個月有效;短期不使用情況下,建議-20℃保存,可保存更長時間。
操作步驟
注意:以下方案主要用于貼壁細胞。對于組織消化,需要先將組織剪碎成合適大小。不同的組織需要消化的時間相差很大,通常以消化后可以充分打散組織為宜。
1. 去除細胞原培養(yǎng)液,使用PBS、不含血清培養(yǎng)液或其他緩沖液洗滌細胞1-2次以去除殘余血清;
2. 加入適量重組胰蛋白酶消化液覆蓋細胞,于顯微鏡下進行消化觀察,大多數(shù)細胞消化時間在30s-3min之間;對于難消化細胞,可放入細胞培養(yǎng)箱中孵育消化一定時間( 消化時間僅供參考,具體消化時間需根據(jù)實際情況而定);
3. 當細胞出現(xiàn)明顯收縮或形態(tài)變化時,吸除重組胰蛋白酶消化液,加入適量含血清的細胞培養(yǎng)液終止消化(如果用移液槍輕輕吹打時很難使細胞從板底脫落,表明消化時間不夠,可加入胰酶細胞消化液重新消化。切忌避免過度消化);
4. 細胞懸液收集置離心管,以800-1200 rpm/min 離心3-5 min,加入適量含血清的細胞培養(yǎng)液(可選);
5. 輕輕吹打細胞,制成細胞懸液,即可傳代培養(yǎng)或后續(xù)實驗。
注意事項
1. 本產(chǎn)品4℃取出可直接用于細胞消化,消化溫度可以根據(jù)需要選擇室溫或者培養(yǎng)箱消化,但是請不要將本產(chǎn)品直接置于37℃預(yù)熱,溫度反復(fù)升降對酶活有一定影響。
2. 收到產(chǎn)品后可以根據(jù)需要分裝保存;如果需要-20℃保存,避免反復(fù)凍融。
3. 不同細胞系或組織消化時間不同,請確認最佳消化時間,以避免消化時間過長導(dǎo)致的過度消化,從而影響細胞活性和狀態(tài)。
4. 本產(chǎn)品為無菌即用型產(chǎn)品,并經(jīng)支原體、內(nèi)毒素等檢測合格,使用過程中請注意無菌操作。
5. 產(chǎn)品在低溫冷凍保存后,可能出現(xiàn)溶液變黃的情況。這是是由于溫度導(dǎo)致溶液pH值發(fā)生變化,在正常解凍復(fù)溫后即恢復(fù)正常顏色,不影響產(chǎn)品使用性能。
6. 為了您的健康和安全,操作時請穿好實驗服、戴好手套。
本產(chǎn)品僅供科研用途,不用于臨床診斷!
(產(chǎn)品包裝升級中,以實物為準。)
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