400-830-9659
產(chǎn)地:ABC
貨號(hào):ABC4040
規(guī)格:100ml
備注:不僅可以替代傳統(tǒng)胰酶的功能,而且可用于嚴(yán)格要求使用無(wú)動(dòng)物源性的特殊細(xì)胞或組織的消化。
胰蛋白酶(Trypsin)簡(jiǎn)稱胰酶,是一種絲氨酸水解酶,能把多肽鏈中賴氨酸和精氨酸中的羧基端切斷。在組織細(xì)胞的提取、培養(yǎng),以及體外細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中,均會(huì)使用到胰蛋白酶消化液,用于水解細(xì)胞間蛋白質(zhì),使組織或細(xì)胞離散成單個(gè)細(xì)胞。傳統(tǒng)胰蛋白酶取自豬、牛等動(dòng)物胰臟。傳統(tǒng)胰酶的來(lái)源和生產(chǎn)工藝特性,決定了其不可避免的會(huì)含有動(dòng)物源雜質(zhì)以及潛在病毒污染。本產(chǎn)品使用重組豬胰蛋白酶替代傳統(tǒng)胰蛋白酶。在生產(chǎn)制備過(guò)程中不使用任何動(dòng)物源性原料,且通過(guò)多輪純化,確保重組豬胰蛋白酶純度以及活率。使其不僅可以替代傳統(tǒng)胰酶的功能,而且可用于嚴(yán)格要求使用無(wú)動(dòng)物源性的特殊細(xì)胞或組織的消化。此外本產(chǎn)品含EDTA,不含酚紅指示劑。
4℃保存,即開(kāi)即用,方便。
儲(chǔ)存與運(yùn)輸
冰袋運(yùn)輸;2-8℃避光保存,12個(gè)月有效;短期不使用情況下,建議-20℃保存,可保存更長(zhǎng)時(shí)間。
操作步驟
注意:以下方案主要用于貼壁細(xì)胞。對(duì)于組織消化,需要先將組織剪碎成合適大小。不同的組織需要消化的時(shí)間相差很大,通常以消化后可以充分打散組織為宜。
1. 去除細(xì)胞原培養(yǎng)液,使用PBS、不含血清培養(yǎng)液或其他緩沖液洗滌細(xì)胞1-2次以去除殘余血清;
2. 加入適量重組胰蛋白酶消化液覆蓋細(xì)胞,于顯微鏡下進(jìn)行消化觀察,大多數(shù)細(xì)胞消化時(shí)間在30s-3min之間;對(duì)于難消化細(xì)胞,可放入細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育消化一定時(shí)間( 消化時(shí)間僅供參考,具體消化時(shí)間需根據(jù)實(shí)際情況而定);
3. 當(dāng)細(xì)胞出現(xiàn)明顯收縮或形態(tài)變化時(shí),吸除重組胰蛋白酶消化液,加入適量含血清的細(xì)胞培養(yǎng)液終止消化(如果用移液槍輕輕吹打時(shí)很難使細(xì)胞從板底脫落,表明消化時(shí)間不夠,可加入胰酶細(xì)胞消化液重新消化。切忌避免過(guò)度消化);
4. 細(xì)胞懸液收集置離心管,以800-1200 rpm/min 離心3-5 min,加入適量含血清的細(xì)胞培養(yǎng)液(可選);
5. 輕輕吹打細(xì)胞,制成細(xì)胞懸液,即可傳代培養(yǎng)或后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
注意事項(xiàng)
1. 本產(chǎn)品4℃取出可直接用于細(xì)胞消化,消化溫度可以根據(jù)需要選擇室溫或者培養(yǎng)箱消化,但是請(qǐng)不要將本產(chǎn)品直接置于37℃預(yù)熱,溫度反復(fù)升降對(duì)酶活有一定影響。
2. 收到產(chǎn)品后可以根據(jù)需要分裝保存;如果需要-20℃保存,避免反復(fù)凍融。
3. 不同細(xì)胞系或組織消化時(shí)間不同,請(qǐng)確認(rèn)最佳消化時(shí)間,以避免消化時(shí)間過(guò)長(zhǎng)導(dǎo)致的過(guò)度消化,從而影響細(xì)胞活性和狀態(tài)。
4. 本產(chǎn)品為無(wú)菌即用型產(chǎn)品,并經(jīng)支原體、內(nèi)毒素等檢測(cè)合格,使用過(guò)程中請(qǐng)注意無(wú)菌操作。
5. 為了您的健康和安全,操作時(shí)請(qǐng)穿好實(shí)驗(yàn)服、戴好手套。
本產(chǎn)品僅供科研用途,不用于臨床診斷!
(產(chǎn)品包裝升級(jí)中,以實(shí)物為準(zhǔn)。)
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